При подготовке новой культуры, сухие вставок в пластине культуры клеток под ультрафиолетового УФ света на мин Вставки два стерилизованные и сухой конфетти на каждой культуры. Место конфетти к краям вставок для получения минимального дублирования. Чтобы раствор стерильный, подключить трубку от газового баллона к фильтру стерильный шприц размером пор 0,22 мкм.
Фильтр пара на другом конце шприца в стерильную пробирку подключен к стерильной стеклянной пипетки. Место стеклянной пипетки в растворе, накрыть парафина и поверните на газ. Держите средний рассечение на ice. Примечание: В идеале, эта процедура должна быть выполнена в стерильных Худ. Если это не представляется возможным, vibratome можно оставить на верстаке. В этом случае рекомендуется использовать маску сети и лица волосы.
Коммуникационные каналы для связи со спонсорами:
С помощью одним краем лезвия бритвы, вырезать прямоугольный кусок примерно 2 см x 0. Примечание: Важно, что все части, которые будут контактировать с ткани мозга полностью сухой, с EtOH может повредить клетки. Придают стерильные лезвия бритвы vibratome и проверки вибрации, если vibratome имеет этой функции. Место газобетона рассечение инструменты в капюшоне вместе с газобетона ткань салфетки, четыре небольших Петри, раунд край скальпель, 2 стеклянные пипетки с резиновыми луковицы, двух рожковый стеклянные пипетки см.
Pour передающиеся вверх рассечение среднего в лодке vibratome и в четырех небольших Петри.
- Новые бесплатные приложения взломать iPhone?
- 10 класс. Руский язык Rudjakov 2010.
- 10 класс. Руский язык Rudjakov 2010!
- Лучше нового мониторинга смартфона без установки?
- Фармацевтический спам?
- Фармацевтический спам;
Примечание: Этот шаг должен только быть сделан непосредственно перед рассечение поскольку средний с этого момента не кипела или хранится на льду Нактоузах и горе мозги. Примечание: Для получения здорового ломтиками, этот шаг должен быть сделано быстро и точно. Необходима определенная практика. Усыпить животных 1 путем дислокации neckor согласно местных руководящих принципов и затем обезглавить с большими ножницами.
Использование малых, острые ножницы, быстро снять кожу, делая Сагиттальный разрез от шеи к носу и тянуть в сторону раскрыть черепа. Разрезом вдоль Сагиттальный шов, а затем боковые разрезы над внутренней части лобной кости и шовный материал lamboid граница между головного мозга и мозжечке. Использовать пинцет согнуть открытый череп на каждой стороне. Черепных нервов отрезаны от мозга, вставив округлые, резкий шпатель под вентральной стороне мозга и осторожно двигаться шпатель боково. Использовать одним краем лезвия бритвы, чтобы сделать корональный вырезать ростральной мозжечка. Примечание: Этот отрезок будет определять угол, на котором нарезаются ломтиками.
Он таким образом, следует на прямой угол. Флип мозг из черепа и в небольшой Петри, содержащие рассечение среднего. Повторить шаги 1.
Фармацевтический спам | Энциклопедия «Касперского»
Примечание: Животные не являются стерильными. Выполните рассечение на одной стороне капота и затем перейти к другой, чистой стороне, как только мозги были удалены из черепа. Изменить перчатки. Присоединить мозга vibratome этап: добавить тонкий слой супер клей на сцену перед навесные агарозном геле. Держать мозг 1 с большой плоский шпатель с свежесрезанных хвостовой стороне трогательно шпателем и облицовки вентральной стороне и быть как можно ближе геля агарозы. Затем осторожно поместите мозг на клей, отталкиваясь шпатель с набором щипцами. Убедитесь в том оставить достаточно пространства для мозга 2.
Примечание: Важно, что мозг хорошо прикреплены на сцену, но без чрезмерного клея, как это может помешать резки. Сразу же после монтажа головного мозга 1, используйте шпатель большой добавить несколько капель рассечение средней верхней части мозга. Это будет держать мозг влажные, упрочнения клея и предотвратить его от прилипания к бокам мозги.
Повторите шаги 1. Прикрепить сцену на лодке vibratome. Собирать фрагменты после того, как каждый ломтик была сокращена с помощью open-end стеклянной пипетки pt. Передача фрагментов на чашку Петри, содержащие рассечение среднего. Использовать закругленными скальпель разрезать фрагменты на две части, деления двух полушарий. Когда все фрагменты вырезаны, место ломтики в культуре блюда.
Взять культуры блюдо один в то время из инкубатора. С помощью пипетки open-end стекла, тщательно передать один срез каждого из конфетти. Примечание: Срезы должны лежать в середине конфетти. Это требует некоторых навыков. Однако, если некоторые фрагменты не являются идеальными, то лучше оставить их чем тратить время пытаются переместить их, как это важно как можно быстрее получить все фрагменты в инкубатор.
Текст письма о сборе пожертвований с примерами: что писать, чтоб собрать денежные средства
Использовать стеклянные пипетки заостренный конец аккуратно удалить избыток среднего без касатьться срез. Примечание: Фрагменты не должен быть погружен в жидкость во время инкубации. Таким образом избыток среднего должны быть придыхательным, таким образом, чтобы срезы подвергаются воздействию воздуха, тонкая пленка среды по-прежнему будет охватывать срезы. Фрагменты, которые по-прежнему погружен в жидкость обычно быть нездоровым или умереть 4 и нашим наблюдениям.
- Лучшее необнаружимое программное обеспечение для отслеживания?
- 2. В тексте производятся незначительные изменения слов или используются повторы.!
- Вот бесплатный способ сканировать сообщения тайно.
- Что рекламируют спамеры.
- Могу ли я прочитать жену Facebook разговоры с помощью iPad без установки каких-либо приложений на св;
- Изменить высоту строки в экселе. Расширение ячеек в Microsoft Excel.
- Есть ли способ отследить телефон моего парня?
- Вы можете получить доступ к ячейке вашего мужа или парень-членов, без его клетки.
- Сотовый телефон SPY Software без установки не смартфонов.
- Какие девять правильных способов использовать GPS для Spy Android Mobile?
- Лучшее отслеживание программного обеспечения для шпиона на текстовых сообщениях для iPad;
- Шпионская камера Wi-Fi телефон.
Перемещение блюдо обратно в инкубаторе, после того как все конфетти один ломтик. Изменить культуру среднего. Примечание: Это должно быть сделано на следующий день после нарезки день 1 в пробирке, DIV1 и затем каждые дня. Подогрева питательной среды в водяной бане или инкубатора.
В стерильных капот, используйте вакуумного всасывания или регулярные пипетки с стерильных наконечником аспирационная питательной среды от каждой скважины. Это делается путем нежно чаевые блюдо на приблизительно 30 градусов и размещение наконечник пипетки на краю культуры Вставка.
Удалить примерно мкл из каждой скважины оставляя только достаточно среднего сохранить в нижней части пластины покрыты в среде. Затем используя чистый пипетки, мкл подогретую среднего для каждой скважины. Затем поместите блюда обратно в инкубатор культуры клеток. Вирусная трансдукции AAVs покупки или сделать с плазмиду интереса, как описано выше 10 , - Конструкции описаны более подробно в другом месте Предупреждение: Следуйте правилам безопасности для работы с AAVs.
Убедитесь в том иметь надлежащую подготовку и требуется утверждение уровня биобезопасности. Все следующие моменты должны осуществляться в шкаф класса II биобезопасности, используя перчатки и лаборатории пальто.
Здесь применение AAV для области коры ломтиков описано, как это область, которая показывает лучшие восстановления. Однако пилот, используя разные титры должно быть сделано для обеспечения плотности transduced олигодендроциты, которая подходит для конкретных экспериментов. Если используются два разных AAVs, они должны смешивать в одном решении и одновременно добавляется фрагмент. Добавить около 1. Пипетка 1.
Before you can use the favorites feature you must sign in or create an account.
Затем медленно толкать раствора из пипетки. Когда решение касается фрагмента, наведите коры распространить решение над районом всей коры наконечник пипетки. Примечание: Эта процедура должна быть выполнена как можно быстрее, чтобы избежать, сохраняя фрагменты из капюшона для дольше, чем необходимо. Сделать это на одно блюдо в то время и положить обратно в инкубаторе первое блюдо перед началом на блюдо 2. Для получения удовлетворительного распределения AAV, не повреждая ткани требует некоторой практики и твердая рука.